微生物淀粉酶
2009-07-30 星期四 | Leon
淀粉酶是α－淀粉酶、β－淀粉酶及葡糖淀粉酶的总称，是现代科学中非常重要的一种酶。由于淀粉酶应用广泛， 因此，在酶家族中，它是非常重要的一种酶。令人感兴趣的是，从真菌中分离的淀粉酶也是第一个用于工业化生产的酶。淀粉酶在食品、发酵、纺织及造纸业中具有 广泛的应用。在淀粉加工厂中，微生物淀粉酶可以成功的取代化学水解，如果酶制备成适合的性状，它也可以应用于制药和精细化工业中。
一、淀粉酶的来源
淀粉酶的来源很广泛，可以来自于植物、动物以及微生物。大部分的淀粉酶存在于微生物中，微生物中主要的两种淀粉酶为α－淀粉酶及葡糖淀粉酶，此外，主要 存在于植物中的β－淀粉酶也存在于少量微生物中。α－淀粉酶是胞外酶，可以随机的切断线状直链淀粉链中连接相邻的两个葡萄糖单位的1，4－α－糖苷键，比 如，淀粉酶可以产生自由的蔗糖称为糖，而没有产生自由蔗糖的液状淀粉只能称谓淀粉液。β－淀粉酶主要来源于植物，但也有少部分微生物产生，它是在外面起作 用的酶，可以分解直链淀粉、支链淀粉以及糖原分子的非还原性末端链，它可以水解交替的糖苷键，产生麦芽糖。葡糖淀粉酶可以水解单个的葡萄糖。
一、淀粉酶的来源
淀粉酶的来源很广泛，可以来自于植物、动物以及微生物。大部分的淀粉酶存在于微生物中，微生物中主要的两种淀粉酶为α－淀粉酶及葡糖淀粉酶，此外，主要 存在于植物中的β－淀粉酶也存在于少量微生物中。α－淀粉酶是胞外酶，可以随机的切断线状直链淀粉链中连接相邻的两个葡萄糖单位的1，4－α－糖苷键，比 如，淀粉酶可以产生自由的蔗糖称为糖，而没有产生自由蔗糖的液状淀粉只能称谓淀粉液。β－淀粉酶主要来源于植物，但也有少部分微生物产生，它是在外面起作 用的酶，可以分解直链淀粉、支链淀粉以及糖原分子的非还原性末端链，它可以水解交替的糖苷键，产生麦芽糖。葡糖淀粉酶可以水解单个的葡萄糖。
Tags: 限制性内切酶常识
2009-05-27 星期三 | Leon
关于限制性内切酶使用的一些常识（什么是同尾酶？）
如何保存限制性内切酶？
不太常用的限制性内切酶多保存在-70oC,每周或每天用的酶保存在-20 oC。有一些酶需要不同的保存条件。使用限制性内切酶时，应将酶保存在冰上。
一般的限制性内切酶反应中（也叫消化），应用多少内切酶？
所用的酶量取决于DNA的纯度、量和型态。限制性内切酶的活力单位定义为在适当的温度下，在1小时内，1ugDNA在50ul体积中，被完全消化所 需的限制性内切酶的量。一般说来，线性DNA比超螺旋DNA更易消化。比如，酶切1uglambdaDNA，需要1-2单位的酶，而酶切1ug质粒 DNA，需要3-5单位的酶。
使用限制性内切酶的一般步骤是什么？
一般步骤如下：
A）测试酶切DNA的量
B）计算完全酶切所需的酶量。为使终体积中甘油的浓度低于8%，计算能加的酶量，最多能加终体积的10%（甘油的浓度为5%）。
C）10X反应液的体积应为终体积的1/10；10X反应液的体积不应小于酶的体积。
D）加入计算好的DNA，10X反应液，酶。
加入水到终体积（20-50 ul），轻轻混匀，在适当的温度下保温。一般酶的最适温度为37 oC，但有例外。应查讯分析说明。
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