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蛋白质浓度测定方法比较

蛋白浓度测定方法有很多种,各种蛋 白质含量测定的研究也屡见报道。每种方法都有其优点和局限性,在蛋白质样品中往往会含有一些化学试剂,有些化学试剂会干扰蛋白浓度测定。因此,寻找合适的 实验方法以避免干扰对蛋白浓度测定的准确性至关重要。基于Lowry法在测定PEG_IL_6样品时出现大量黄绿色沉淀,尿素对BCA法测定蛋白浓度测定 有严重干扰,影响结果准确性,我们试验了另外两种方法,并进一步对方法进行了比较分析。
1 材料
Folin酚试剂、考马斯亮蓝G_250及4,4-二羧酸-2,2-二喹啉(BCA)均为Sigma公司产品;总蛋白(BSA)标准购自上海生物制品研究所;变性液为大肠杆菌破碎后加入β一巯基乙醇处理的样品;其它试剂均为国产分析纯。
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Lowry法操作参考文献[4]。磺基水杨酸沉淀法操作参考文献[5]。Bradford法操作参考文献[6],为方便试验稍作改变,即取0~500 gg/mL的样品100 L加Bradford试剂2 mL,室温放置5 min在595 nm波长处测定吸光度。

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